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    产品名称:Delivector ? 小分子化合物转染试剂

    产品货号:DW0057

    产品包装:500ul

    产品价格:250

    保存温度:-20℃

    保质期:一年

    说明书下载

    产品介绍:

    Delivector是一款优秀、低成本、值得信赖的瞬时性转染试剂。在HEK293和CHO表达系统中,可在大的生产容器内(从96孔板到100L生物反应器)提供连续性的高基因表达。

    本品是Delivector的无菌溶液,浓度为1mg/ml,可直接使用。按照小分子化合物:Delivector=1:3的比例来操作,1ml本品足以用来转染330μg小分子化合物。

     

    保存说明:

    -20℃保存,有效期1年

     

    使用说明:(贴壁细胞)

    1. 铺板:

           转染前18-24h进行铺板,调整合适的细胞密度(参考表1),使其在转染时细胞密度达60-80%。

    2. 转染:(以6孔板为例)

    a. 转染前1-2h,每孔替换为3ml含2%血清的新鲜生长培养基,转染前去除该培养基。

    b. 制备Delivector-小分子化合物转染复合物(请严格按照以下步骤进行):

    ①往300μl无血清培养基加入2μg质粒小分子化合物,混匀。

    ②在混合物内加入6μl Delivector(1mg/ml)(小分子化合物/Delivector=1:3),混匀。

    ③无菌环境,室温静置30min以形成Delivector-小分子化合物转染复合物。

    ④用移液枪上下吹打3次,轻轻混匀。

    c. 将Delivector-小分子化合物转染复合物转到孔内。轻轻晃动培养皿或轻微涡旋,使复合物分散均匀。

    3. 孵育:

    a. 37℃,5% CO2培养箱内培养细胞,转染12-18h,去除含Delivector-小分子化合物复合物的培养液,更换新鲜的培养基。

    b. 通常,转染36-48h后能检测到重组蛋白表达。一般在转染后72-96h能观察到最大水平的表达。

     

    注意事项:

    1. 收到本品或第一次使用前,请根据单次用量分装后置于-20℃冻存,尽量减少反复冻融次数。

    2. 本品为无菌溶液,请严格按照无菌操作进行。

    3. 请使用高质量的无内毒素质粒。通过260 nm光吸收测定小分子化合物浓度,260nm / 280nm比值确定小分子化合物纯度(比值应该在1.8~2.0的范围之内)。如有条件,请通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒的完整性。

    4. 请使用保存适当和经常传代的健康细胞。确保培养基没有被细菌、真菌或支原体污染。细胞如果是近期复苏的液氮冻存细胞,请在转染前至少传代两次。

    5. 对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞,在转染前两天铺板可显著提高重组蛋白的表达水平。如果选择转染前两天铺板,可适当降低铺板密度,以确保转染时细胞的汇合度仍为60-80%。

    6. 对于接触抑制敏感的细胞,可适当降低铺板密度。

    7. 推荐用商业化的无血清培养基比如Opti-MEM I来稀释小分子化合物和Delivector,制备转染复合物。

    8. 转染过程中请不要使用抗生素

    9. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

    10. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

     

    本产品在文章中的写法:

    英文: Dowobio (Shanghai,China)

    中文: 上海28圈加拿大技有限公司  Dowobio,上海

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